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對于液相色譜儀色譜柱保養(yǎng)須知

更新時(shí)間:2020-03-19      瀏覽次數(shù):2626
  
  
  液相色譜儀的系統(tǒng)由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運(yùn)動時(shí),經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
  
  正常情況下,液相色譜儀色譜柱至少可以使用3~6個(gè)月,能完成數(shù)百次分離。但若操作不慎,將很容易損壞色譜柱而不能使用。因此為了保持柱效、柱容量和滲透性,必須對色譜柱進(jìn)行仔細(xì)保養(yǎng)。
  
  一、色譜柱的保護(hù):
  
  1、流動相和樣液都需用0.45um孔徑的濾膜過濾。
  
  2、加3~5cm保護(hù)柱。
  
  3、進(jìn)樣閥進(jìn)樣。
  
  4、用純甲醇保存色譜柱,防止細(xì)菌生長。
  
  5、防止過酸或過堿。
  
  6、防止振動和逆向流動。
  
  7、對硅膠基鍵合相,水溶液流動相的PH值不得超出2~8.5的范圍,使用溫度不宜過高。
  
  8、色譜柱在酸性或堿性條件下使用后,應(yīng)依次用水和甲醇清洗。對暫時(shí)不用而需要較長時(shí)間保存的色譜柱,要用純甲醇清洗。
  
  9、色譜柱兩端用金屬螺帽封閉,保存在干凈的有機(jī)溶劑中。
  
  二、色譜柱的再生:
  
  一般情況下,硅膠和ODS等化學(xué)鍵合固定相再生是困難的。有時(shí)采用下述方法可能提高柱效。
  
  1、由于雜質(zhì)微粒等因素,使色譜柱上端固定相變色,柱效下降。這時(shí),可仔細(xì)地將變色部分除去約3mm左右,再補(bǔ)充新的固定相。
  
  2、當(dāng)色譜柱吸附未被洗脫的成分時(shí),柱效將明顯下降,可選擇合適的溶劑洗凈。
  
  3、當(dāng)采用梯度洗脫時(shí),色譜柱在重復(fù)使用前,用泵把幾倍于柱體積的起始溶劑壓經(jīng)色譜柱,以重新建立起始的平衡來得到再生。
  
  
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